Как делать серийные разведения: 9 шагов (с изображениями)

Разбавление в химии - это процесс, который снижает концентрацию вещества в растворе. Серийное разведение - это повторное разведение раствора для быстрого увеличения коэффициента разведения. Обычно его проводят в экспериментах, требующих сильно разбавленных растворов, например, в экспериментах с кривыми концентрации в логарифмической шкале или при определении плотности бактерий. Серийные разведения широко используются в экспериментальных науках, таких как биохимия, микробиология, фармакология и физика.

Шаги

Метод 1 из 2: выполнение основного разведения

Шаг 1. Определите подходящую жидкость для разбавления

Жидкость, в которой вы будете разбавлять свое вещество, очень важна. Многие растворы разбавляют дистиллированной водой, но это не всегда так. Если вы разбавляете бактерии или другие клетки, вы, вероятно, захотите разбавить их в питательной среде. Выбранная вами жидкость будет использоваться для каждого серийного разведения.

Если вы не знаете, какую жидкость использовать, обратитесь за помощью или проверьте в Интернете, выполняли ли другие люди подобное разведение

Шаг 2. Подготовьте несколько пробирок с 9 мл разбавляющей жидкости

Эти пробирки будут использоваться в качестве заготовок для разбавления. Вы будете добавлять неразбавленный образец в первую пробирку, а затем последовательно разбавлять в следующие пробирки.

• Перед тем, как начать, полезно промаркировать все пробирки, чтобы не запутаться, когда вы начнете с разведениями.
• Каждая пробирка будет 10-кратным разбавлением, начиная с неразбавленной пробирки. Первая пробирка будет разбавлена 1:10, вторая - 1: 100, третья - 1: 1000 и т. Д. Определите количество разбавлений, которое вам нужно сделать заранее, чтобы не тратить впустую пробирки или разбавлять жидкость.

Шаг 3. Подготовьте пробирку с как минимум 2 мл неразбавленного раствора

Минимальное количество, необходимое для выполнения этого серийного разведения, составляет 1 мл неразбавленного раствора. Если у вас всего 1 мл, у вас не останется неразбавленного раствора. Пометьте эту пробирку US для неразбавленного раствора.

Тщательно перемешайте раствор перед тем, как начинать разведение

Шаг 4. Выполните первое разведение

Наберите с помощью пипетки 1 мл неразбавленного раствора из пробирки US и перенесите его в пробирку с меткой 1:10, содержащую 9 мл разбавляющей жидкости, и тщательно перемешайте. Теперь в 9 мл разбавляющей жидкости находится 1 мл неразбавленного раствора. Таким образом, раствор был разбавлен в 10 раз.

Шаг 5. Выполните второе разведение

Для второго серийного разведения необходимо взять 1 мл раствора из пробирки 1:10 и добавить его к 9 мл разбавляющей жидкости в пробирке 1: 100. Тщательно перемешайте пробирку 1:10 перед добавлением в следующую пробирку. Снова перемешайте в пробирке 1: 100 после разбавления. Раствор из пробирки 1:10 разводили в 10 раз в пробирке 1: 100.

Шаг 6. Расширьте эту процедуру, чтобы выполнить более длительные серийные разведения

Этот процесс можно повторять столько раз, сколько необходимо для достижения желаемого решения. В эксперименте, включающем кривые концентрации, вы можете использовать серийное разведение для создания серии растворов с разведениями 1, 1:10, 1: 100, 1: 1, 000.

Метод 2 из 2: Расчет конечного коэффициента разбавления и концентрации

Шаг 1. Рассчитайте конечный коэффициент разбавления в серийном разведении

Общий коэффициент разбавления может быть определен путем умножения коэффициента разбавления на каждом этапе, ведущем к последнему этапу. Математически это можно проиллюстрировать уравнением D_т = D₁ x D₂ x D₃ х… х D где D_т - общий коэффициент разбавления, а D - коэффициент разбавления.

• Например, предположим, что вы 4 раза разбавили жидкость 1:10. Подставьте коэффициент разбавления в уравнение: D_т = 10 х 10 х 10 х 10 = 10 000
• Коэффициент окончательного разбавления четвертой пробирки в вашем серийном разведении составляет 1:10 000. Концентрация вашего вещества теперь в 10 000 раз меньше, чем в исходном неразбавленном растворе.

Шаг 2. Определите концентрацию раствора после разбавления

Чтобы определить конечную концентрацию вашего раствора после серийного разбавления, вам необходимо знать свою начальную концентрацию. Уравнение C_{окончательный} = C_{исходный}/ D где C_{окончательный} - конечная концентрация разбавленного раствора, C_{исходный} - начальная концентрация исходного раствора, а D - ранее определенная степень разбавления.

• Например: если вы начали с раствора клеток с концентрацией 1 000 000 клеток на мл, а ваш коэффициент разбавления составляет 1 000, какова конечная концентрация вашего разбавленного образца?

• Используя уравнение:

  • C_{окончательный} = C_{исходный}/ D
  • C_{окончательный} = 1, 000, 000/1, 000
  • C_{окончательный} = 1000 клеток на мл.

Шаг 3. Убедитесь, что все единицы совпадают

Выполняя какие-либо вычисления, вы хотите убедиться, что ваши единицы всегда совпадают в конце. Если вы начали с клеток на мл, убедитесь, что вы закончили с клеток на мл. Если ваша начальная концентрация составляет частей на миллион (ppm), то ваша конечная концентрация должна быть ppm.