Во время пандемии коронавируса SARS-CoV-2 ранняя и надежная диагностика имеет решающее значение для контроля за распространением инфекции. Для этого используются диагностические тесты, в том числе прежде всего молекулярные и иммунологические тесты. В то же время на рынке все чаще появляются экспресс-кассетные тесты на коронавирус. Какие тесты на коронавирус выбрать и все ли они надежны?
Тесты на коронавирус необходимы для подтверждения заражения коронавирусом SARS-CoV-2. Симптомы, возникающие при заражении, неясны, а иногда и не проявляются. Поэтому для диагностики используют тесты - чаще всего молекулярные и иммунологические, хотя есть и кассетные тесты.
Что такое коронавирус и как он распространяется?
Коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома 2 (SARS-CoV-2) - это новый вирус, вызывающий заболевание COVID-19. SARS-CoV-2 принадлежит к семейству коронавирусов, в которое также входят SARS-CoV и MERS-CoV. Коронавирус SARS-CoV-2 был идентифицирован в начале января 2020 года как причина вспышки пневмонии в городе Ухань, Китай. Заразив и убив тысячи людей в Китае, коронавирус распространился по всему миру, вызвав пандемию.
Передача коронавируса от человека к человеку происходит воздушно-капельным путем при тесном контакте, а также через поверхности, загрязненные выделениями больного. Следовательно, гигиена рук необходима для предотвращения заражения коронавирусом.
Основные симптомы заражения:
- температура выше 38°C,
- кашель,
- усталость,
- одышка,
- а еще болит горло,
- головная боль,
- конъюнктивит,
- потеря вкуса и обоняния
- и проблемы с желудочно-кишечным трактом.
Симптомы появляются в течение 14 дней после контакта с коронавирусом. Однако в большинстве случаев (97,5%) они начинаются в течение 11 дней.
Здесь, однако, следует подчеркнуть, что симптомы коронавирусной инфекции варьируются от человека к человеку, начиная от бессимптомной инфекции до тяжелой дыхательной недостаточности и т. н. цитокиновый шторм. Последние особенно уязвимы для групп высокого риска, таких как пожилые люди или люди с сопутствующими заболеваниями (диабет и сердечно-сосудистые заболевания).
Когортное итальянское исследование, проведенное в городе Во-Эуганео доктором Лавеццо и его коллегами, показало, что 50-75% людей с положительным тестом на мазок из горла остаются бессимптомными, в то время как у других развиваются легкие симптомы гриппа. Напротив, только у 10% всех пациентов с симптомами наблюдаются более тяжелые проявления инфекции.
Читайте также: Симптомы коронавируса. Проверьте наличие симптомов COVID-19
Тесты на коронавирус - какой лабораторный тест выбрать?
Необходимо провести специализированные лабораторные исследования для определения заражения коронавирусом SARS-CoV-2, так как это невозможно только на основании клинических симптомов. В настоящее время существует два типа лабораторных тестов на коронавирус:
- молекулярные (генетические) тесты
- иммунологические тесты (серологические или антигенные)
Обратите внимание, что диагностическая ценность вышеуказанных тестов может различаться.
Тесты на коронавирус - список тестов на коронавирус [ТАБЛИЦА]
| Молекулярное (генетическое) тестирование | Иммунологические (серологические) тесты | Кассетные тесты | |
| Метод исследования | РВ-ПЦР в реальном времени | иммуноферментные или иммунохимические методы | иммунохроматографические методы |
| Учебный материал | мазок из зева или носоглотки | венозная кровь | капиллярная кровь, взятая из пальца |
| Что он обнаруживает? | генетический материал вируса - РНК | Антитела IgM, IgA или IgG против вируса | Антитела IgM, IgA или IgG против вируса |
| Цель исследования | подтверждение активной инфекции | подтверждение прошлой инфекции | подтверждение прошлой инфекции |
| Место казни | лаборатория | лаборатория | дом или медицинский пункт |
| Цена экспертизы | 450-500 злотых | 100-220 злотых | 30-60 злотых |
| Время ожидания результата | до 3 дней | до 3 дней | от нескольких минут до 1 дня |
Тесты на коронавирус - молекулярное тестирование
Молекулярные тесты полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени (ОТ-ПЦР) - единственные, рекомендованные Всемирной организацией здравоохранения, которые могут подтвердить активную коронавирусную инфекцию.
Тесты, основанные на ОТ-ПЦР в реальном времени, основаны на многократном дублировании в несколько десятков циклов определенного фрагмента генетического материала коронавируса, то есть РНК. Для этого используется фермент под названием полимераза и определенные пары праймеров, которые соответствуют данному фрагменту вирусной РНК. В случае коронавируса SARS-CoV-2 это, например, фрагмент, кодирующий белок нуклеокапсида (N) или оболочки (E).
Следующим этапом диагностического процесса является визуализация размноженного фрагмента генетического материала с помощью специальных флуоресцентных красителей. ОТ-ПЦР в реальном времени, благодаря амплификации специфических фрагментов генетического материала вируса и использованию флуоресцентных красителей, является сверхчувствительным методом по сравнению с другими молекулярными методами. Поэтому он способен обнаруживать даже небольшое количество частиц коронавируса в тестируемом биологическом материале.
Конечно, для получения наиболее надежных результатов во время самого теста ОТ-ПЦР в реальном времени используется ряд внутренних контролей: положительный, который представляет собой РНК вируса, и отрицательный, которым обычно является вода.
Стоит знать, что ограничением молекулярных методов является возможность получения ложноотрицательных результатов, которые могут быть вызваны неправильным способом или неправильным временем взятия проб.
Обычно для молекулярного тестирования у бессимптомных людей берут материал из верхних дыхательных путей, например, мазок из носоглотки, в котором количество частиц коронавируса постепенно уменьшается с течением времени.
Лучше всего собирать материал из нижних дыхательных путей, такой как мокрота, бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ) или бронхоаспират, хотя обычно его собирают у людей с тяжелыми симптомами коронавирусной инфекции.
В заключение следует отметить, что молекулярные тесты в настоящее время являются единственными, рекомендованными Всемирной организацией здравоохранения для подтверждения активной инфекции коронавирусом SARS-CoV-2. Однако молекулярные тесты не дадут ответа на вопрос, заразился ли уже человек. Это возможно благодаря иммунологическим тестам.
Тесты на коронавирус - иммунологический тест
Иммуноанализ на коронавирус измеряет наличие иммунных белков (антител), вырабатываемых иммунной системой пациента после контакта с вирусом, или наличие белков (антигенов) коронавируса в крови или биологическом материале, взятом из верхних дыхательных путей.
Чтобы понять, что выявляют иммуноанализы, нужно знать, как работает иммунный ответ человека. После попадания коронавируса в организм происходит активация клеток, вырабатывающих против него антитела класса М (IgM). Затем с течением времени антитела IgM постепенно заменяются антителами класса G (IgG). Кроме того, организм вырабатывает антитела класса А (IgA), которые также можно использовать при диагностике коронавируса SARS-CoV-2. Это антитела, которые в первую очередь важны, если они определяются в секрете дыхательных путей, ведь именно там организм вырабатывает их больше всего.
Стоит отметить, что время появления индивидуальных антител у разных возбудителей разное. В случае коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 это время составляет около 2 недель. И это одно из самых больших ограничений иммунологических исследований.
С момента заражения коронавирусом до выработки специфических антител (около 2 недель) они могут отсутствовать или находиться в слишком низкой концентрации, чтобы их можно было обнаружить лабораторным тестом. В этой ситуации мы имеем дело с ложноотрицательным результатом, т.е. человек заражен коронавирусом, а тест показывает отрицательный результат. Такие результаты могут быть получены и у людей с иммунодефицитом, у которых нарушен механизм выработки антител.
В диагностических лабораториях для выявления антител IgM, IgA и IgG к коронавирусу или, возможно, его антигенам используются иммуноферментные, иммунохимические и иммуноблоттинговые методы.
Явное преимущество иммуноанализов по сравнению с молекулярными методами заключается в том, что они могут идентифицировать людей, ранее инфицированных коронавирусом SARS-CoV-2, даже тех, у кого не было симптомов.
Тем не менее, недостатком иммунотестов на коронавирус остается риск ложноположительных результатов, т.е. человек не заражен коронавирусом, а тест показывает положительный результат. Это может произойти, например, у людей, инфицированных другими вирусами из семейства коронавирусов.
В заключение отметим, что серологические тесты, выявляющие антитела к коронавирусу SARS-CoV-2, могут помочь в выявлении инфицированных людей, но не используются для подтверждения активных случаев коронавирусной инфекции. Иммунные тесты могут быть полезны при эпидемиологическом надзоре для выявления лиц, переболевших коронавирусной инфекцией.
Тесты на коронавирус - экспресс-тесты
В связи с пандемией COVID-19 и необходимостью быстрого выявления инфицированных людей и ограниченными возможностями диагностических лабораторий тесты на т.н. экспресс-диагностика коронавируса, т.е. кассетные тесты. Кассетные тесты основаны на том же принципе действия, что и тесты на беременность, которые можно приобрести в аптеке и использовать иммунохроматографические методы.
Требуется небольшое количество крови, взятой из пальца. Большим преимуществом этих тестов является возможность провести тест вне лаборатории и получить результат через несколько или несколько десятков минут.
Эти тесты на самом деле являются типом иммунологического теста, поскольку они проверяют наличие белков (антигенов) коронавируса в образце, взятом из дыхательных путей, или наличие антител против вируса в крови. Однако для того, чтобы такой тест давал надежные результаты, требуется его надлежащая валидация, т.е. подтверждение его достоверности.
Неправильно подобранные экспресс-тесты могут не выявлять инфицированных людей (ложноотрицательные результаты) или давать ложноположительные результаты у здоровых людей.
Исходя из текущих данных, Всемирная организация здравоохранения не рекомендует использовать быстрые диагностические тесты на антитела при лечении пациентов из-за все еще слабых научных данных. Тем не менее, он призывает к продолжению исследований, чтобы определить их полезность для мониторинга инфекций и эпидемиологических исследований.
Тесты на коронавирус - как выглядит материал для тестирования?
Для получения достоверного результата теста на коронавирус очень важно собрать соответствующий биологический материал для тестирования. Сбор для молекулярного исследования заключается в получении мазка из носоглотки или зева с помощью специального тампона.
Тест достаточно неприятный для человека, у которого берется материал. Образцы нижних дыхательных путей, такие как мокрота или бронхиально-альвеолярный лаваж (БАЛ), могут быть альтернативным выбором в некоторых случаях.
Для взятия пробы из носоглотки мазок глубоко вводится через нос пациента и вращается несколько раз в течение нескольких секунд. Процедура проводится в обе ноздри.
Напротив, если образец берется из горла и слизистой носа одновременно, тампон сначала вводится глубоко в горло. Затем собиратель несколько раз вращает его и растирает о поверхность слизистой зева. Затем тампон вводят в обе ноздри. Для иммунологического исследования берут венозную кровь из локтевого сгиба.
Тесты на коронавирус - кто должен делать тест?
- люди с гриппоподобными симптомами, такими как высокая температура, постоянный кашель, одышка
- люди, побывавшие в районах с высоким уровнем заболеваемости COVID-19
- человек, имевший тесный контакт с человеком, у которого диагностирована коронавирусная инфекция SARS-CoV-2
- человек, который работает или посещает медицинское учреждение, где проходят лечение лица, инфицированные коронавирусом
Тесты на коронавирус - как интерпретировать результаты иммунологических тестов?
- высокая концентрация антител IgM (или IgA) и IgG - вероятно активная коронавирусная инфекция, также бессимптомная. В этом случае следует обратиться к врачу для подтверждения инфекции молекулярными методами.
- высокий IgM (или IgA) и низкий IgG - вероятно активная коронавирусная инфекция, также бессимптомная. В этом случае следует обратиться к врачу для подтверждения инфекции молекулярными методами.
- низкий уровень IgM (или IgA) и высокий уровень IgG - вероятно, в анамнезе коронавирусная инфекция.
- низкий уровень IgM (или IgA) и IgG - возможно, нет инфекции или контакта с коронавирусом. Однако отрицательный результат иммунологического теста не исключает активной инфекции.
Тесты на коронавирус - как интерпретировать результаты молекулярных тестов?
- отрицательный - в исследуемом материале коронавирус SARS-CoV-2 не обнаружен. Это означает отсутствие коронавирусной инфекции, однако, заметьте, единичный отрицательный результат теста не исключает заражения коронавирусом, особенно у людей из группы высокого риска, если тест проводится с помощью мазка из носоглотки и в начале заражения. В этом случае может быть целесообразно повторить тест или взять образец из более глубоких дыхательных путей, например БАЛ.
- недиагностический - это означает, что образец не подлежит тестированию и необходимо взять другой образец
- неубедительный/неубедительный - это означает, что результат находится на пределе аналитической чувствительности теста и требует взятия еще одной пробы через 24-48 часов
- положительный - в исследуемом материале обнаружен коронавирус SARS-CoV-2. Это означает активную коронавирусную инфекцию и требует немедленного обращения в санэпидемстанцию
Тесты на коронавирус - где их можно сделать?
Люди с подозрением на коронавирусную инфекцию должны сообщить в ближайшую санитарно-эпидемиологическую станцию, где им сообщат, где можно будет пройти возмездное молекулярное исследование на коронавирус.
Кроме того, Минздрав последовательно обновляет список лабораторий, в которых проводятся тесты на коронавирус: список COVID-лабораторий.
За отдельную плату молекулярные, иммунологические и кассетные тесты могут быть выполнены в коммерческих лабораториях.